Calu-3細胞，Calu-3細胞株的復蘇方法

產品名稱：Calu-3細胞

中文名稱：腺癌細胞

貨號：Calu-3

規格：1~3*106細胞/25cm2培養瓶

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1.預熱培養用液把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。

2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。

6.取出預熱好的培養用液取出已經預熱好的培養用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。

7.從培養箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。

8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出舊培養液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。

2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞

消化適度。

3.吸棄消化液加入培養液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養液。

三.吹打分散細胞

1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。1.預熱培養用液把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。

2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。

6.取出預熱好的培養用液取出已經預熱好的培養用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。

7.從培養箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。

8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出舊培養液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。

2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞

消化適度。

3.吸棄消化液加入培養液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養液。

三.吹打分散細胞

1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。1.預熱培養用液把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。

2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。

6.取出預熱好的培養用液取出已經預熱好的培養用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。

7.從培養箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。

8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出舊培養液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。

2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞

消化適度。

3.吸棄消化液加入培養液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養液。

三.吹打分散細胞

1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。

3.平衡離心平衡后將離心管放入臺式離心機中以1000轉/分鐘離心6-8分鐘。

4.棄上清液加入新培養液棄去上清液加入2ml培養液用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。