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上海細(xì)胞庫,大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,PMVEC,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
上海蒂科生物主營(yíng)業(yè)務(wù):胎牛血清(HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA),無外泌體血清SBI,ELISA試劑盒,細(xì)胞(400多種類通過STR鑒定),培養(yǎng)基(干粉、液體),雙抗,胰酶,CST,abcam,sigma等抗體。詳詢(同號(hào)),。
細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見和zui基本的實(shí)驗(yàn)了,但卻不是zui簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好,轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。
上海細(xì)胞庫,大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,PMVEC,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,HAKATA、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。
◆ MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞。
◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。
◆ RPMI-1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
以前經(jīng)常聽到有人問,這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問題的答案可以很簡(jiǎn)單,也可以好復(fù)雜。此話怎講?如果這種細(xì)胞是購自ATCC 或其他的細(xì)胞庫,那很簡(jiǎn)單,問供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻(xiàn),作為參考。 Invitrogen上有一個(gè)Cell Line Database的工具,也很好用。選擇你感興趣的細(xì)胞類型,它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。Sigma上也有一個(gè)Media Expert,包括了培養(yǎng)基所有成分的功能描述、使用推介和參考文獻(xiàn)等,它還是一個(gè)解決問題能手,對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)中的常見問題,如細(xì)胞貼壁不好、培養(yǎng)基變色等,它都會(huì)列出可能的原因,并提供補(bǔ)救辦法。這個(gè)Expert果然不簡(jiǎn)單! 但如果你是著手建立一種全新細(xì)胞的培養(yǎng)體系,根本找不到任何參考,那你就得花點(diǎn)時(shí)間自己試驗(yàn)了。萬事開頭難嘛。因?yàn)闆]有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)答案。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)。總之,shou選MEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI 1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)是一個(gè)好的開始。你也可以購買幾種培養(yǎng)基來,然后花大約兩周的時(shí)間做一個(gè)簡(jiǎn)單的細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),來選擇其中zui適合的。有時(shí)候你會(huì)驚訝地發(fā)現(xiàn)你的zui佳培養(yǎng)條件與文獻(xiàn)報(bào)道的不同,就算是同一種培養(yǎng)條件,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)也時(shí)好時(shí)壞,這是很正常的。因?yàn)樵噭⑺⒉煌?hào)的血清之間都存在著差異。要提高培養(yǎng)基的穩(wěn)定性,可以從培養(yǎng)基和血清兩方面入手。
,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會(huì)減少,因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的,批間差會(huì)很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在非也。HyClone和Invitrogen都在國(guó)內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的生產(chǎn)基地,生產(chǎn)和運(yùn)輸成本大幅降低,所以現(xiàn)在的價(jià)格也只是50-60元/500ml,比干粉培養(yǎng)基貴不了多少,而且還幫你省了過濾器和時(shí)間。
血清含有生長(zhǎng)因子可促進(jìn)細(xì)胞的繁殖,含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁,同時(shí)還具有抗胰酶活性。血清同時(shí)也是礦物質(zhì)、脂類及激素的來源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時(shí)間的早晚來分類的。采血時(shí)間越早,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合要求高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng)。由于瘋牛病的原因,到目前為止,我國(guó)政府仍然禁止從北美洲、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清,因此市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,或是國(guó)產(chǎn)的。 而血清批次間的差別就是不可避免的,這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動(dòng)物的年齡差別及血清的儲(chǔ)存條件等,而且與取血?jiǎng)游锏膩碓搓P(guān)系密切。不同的牧場(chǎng)、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。因此選好了一種血清就要盡可能長(zhǎng)期使用它。在需要更換時(shí),也要盡量保持與原有的一批血清相似。
,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
現(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留,你一旦選定了某個(gè)批次的血清,zui好備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩。血清固然是細(xì)胞培養(yǎng)中*的成分,但正如上文所說,血清的批間差異大,更換血清時(shí)需要做大量的測(cè)試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應(yīng)也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響,說不定哪天血清就突然沒得賣了,那對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響可非同小可。另外,血清的價(jià)格也很昂貴,雖說現(xiàn)在也有便宜的國(guó)產(chǎn)血清,但是高品質(zhì)的澳洲血清價(jià)格仍舊高起。因此,也有一些實(shí)驗(yàn)室開始換用無血清培養(yǎng)基。
,細(xì)胞培養(yǎng)試劑*:
Mv-4-11  | 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞  | MMQ  | 大鼠垂體瘤細(xì)胞  | 
RPMI 8226  | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞  | GH3  | 大鼠垂體瘤細(xì)胞  | 
NALM-6  | 人急性B淋巴白血病細(xì)胞  | 大鼠LSECs  | 大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞  | 
Nthy-ori 3-1  | 人甲狀腺正常細(xì)胞  | MOLP-2  | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞  | 
FHC  | 人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞  | BTT739  | 小鼠膀胱移行細(xì)胞癌  | 
FLS  | 大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞  | A875  | 人黑色素瘤細(xì)胞  | 
HFL  | 人成纖維樣滑膜細(xì)胞  | SNU-761  | 人肝癌傳代細(xì)胞  | 
HLEB3  | 人晶狀體上皮細(xì)胞系  | HPaSteC(HPSC)  | 人胰腺星狀細(xì)胞  | 
HN13  | 人口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞  | BMDC  | 小鼠樹突狀細(xì)胞  | 
RLE-6TN  | 大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞  | McCoy  | 小鼠成纖維細(xì)胞  | 
PA-TU-8988S  | 人胰腺癌細(xì)胞  | SU86.86  | 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞  | 
HEEC  | 人正常食管上皮細(xì)胞  | KYSE140  | 人食管鱗癌細(xì)胞  | 
MES-SA  | 人子宮肉瘤細(xì)胞  | WSU-DLCL2  | 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞  | 
MCFs  | 小鼠心肌成纖維細(xì)胞  | NCI-H596  | 人肺鱗癌細(xì)胞  | 
EHEB  | 人慢性B細(xì)胞白血病細(xì)胞  | CCD-19Lu  | 人肺成纖維細(xì)胞  | 
SNK6  | 人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  | HIMEC  | 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | 
PIG1  | 正常人皮膚黑色素細(xì)胞  | HDSMC  | 人表皮血管平滑肌細(xì)胞  | 
hTERT-RPE1  | 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞  | EM-3  | 人髓系白血病細(xì)胞  | 
ARPE-19/APRE-19  | 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞  | KYSE50  | 低分化人食管鱗癌細(xì)胞  | 
HO8910PM  | 人卵巢癌細(xì)胞  | DSL-6A/C1  | 大鼠胰腺癌細(xì)胞  | 
IPI-2I  | 豬回腸上皮細(xì)胞  | PC14  | 人肺癌細(xì)胞  | 
RT4-D6P2T  | 大鼠神經(jīng)雪旺氏細(xì)胞  | Capan-1  | 人胰腺管癌細(xì)胞  | 
HUVEC  | 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞  | TEV-1  | 人滋養(yǎng)層細(xì)胞  | 
HTR8-SVneo  | 人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞  | MZ-CRC-1  | 人髓樣甲狀腺癌細(xì)胞  | 
KG-1a  | 人急性骨髓白血病細(xì)胞  | HS27  | 人皮膚成纖維細(xì)胞  | 
OCI-AML3  | 人急性髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞  | H2.35  | 小鼠肝細(xì)胞  | 
bEnd.3  | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | KMBC  | 人膽管癌細(xì)胞  | 
C4-2  | 人前列腺癌細(xì)胞  | KHYG-1  | 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  | 
C4-2B  | 人前列腺癌細(xì)胞  | Nutu19  | 大鼠卵巢癌細(xì)胞  | 
DOK  | 人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞  | KU-19-19  | 人膀胱癌細(xì)胞  | 
SCC-15  | 人舌磷癌細(xì)胞  | HUH-1  | 人肝癌細(xì)胞  | 
DT40  | 雞淋巴瘤細(xì)胞  | NCI-H1373  | 人肺腺癌細(xì)胞  | 
RBE4  | 大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞  | Colo357  | 人胰腺癌細(xì)胞  | 
SCC-090  | 人口腔鱗癌細(xì)胞  | LSC-1  | 大鼠肝星形細(xì)胞  | 
SCC-9  | 人舌鱗癌細(xì)胞  | CCC-HPF-1  | 人胚肺成纖維細(xì)胞  | 
SCC-4  | 人舌鱗癌細(xì)胞  | HAPI  | 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞  | 
SCC-25  | 人舌鱗癌細(xì)胞  | NCI-H322[H322]  | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  | 
THLE-2  | SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞  | HT115  | 人結(jié)腸癌細(xì)胞  | 
THLE-3  | SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞  | CCD-841 CoTr  | 人結(jié)腸癌細(xì)胞  | 
CAL-51  | 人乳腺癌細(xì)胞  | CNLMG-B5537SKIN  | 人成纖維細(xì)胞  | 
CAL-148  | 人乳腺癌細(xì)胞  | TMK-1  | 人胃癌細(xì)胞  | 
ZYM-DIEC02  | 豬小腸上皮細(xì)胞  | GTL16  | 人胃癌細(xì)胞  | 
G422  | 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞  | SW954  | 人外陰鱗癌細(xì)胞  | 
BMSC/hBMSCs  | 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞  | HHL-5  | 人胚胎肝細(xì)胞  | 
VCaP  | 人前列腺癌細(xì)胞  | NHLF  | 人正常肺成纖維細(xì)胞  | 
VX2  | 兔間變表皮鱗癌瘤株  | MOLP-8  | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞  | 
CF-1 MEF  | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞  | MCF-12F  | 人乳腺上皮細(xì)胞  | 
AR42J  | 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞  | NCI-H226  | 人肺鱗癌細(xì)胞  | 
PMVEC  | 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | MCAEC  | 小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞  | 
GES-1  | 人胃粘膜細(xì)胞  | IAR20  | 大鼠肝細(xì)胞  | 
Toledo  | 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  | NCI-H2087  | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  | 
9L  | 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞  | MDA-PCA-2B  | 人前列腺癌細(xì)胞  | 
MLE-12  | 小鼠肺上皮細(xì)胞  | OCM-1A  | 人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞  | 
KBM5  | 人慢性髓白血病細(xì)胞  | SHP-77  | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  | 
VSC4.1  | 脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞系  | MBMEC  | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | 
HIC  | 人小腸癌細(xì)胞系  | DMS114  | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  | 
LN-18  | 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞  | RCC4  | 人腎癌細(xì)胞  | 
Kupffer  | 肝枯否細(xì)胞  | HOMEC  | 人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | 
SNU475  | 人肝癌細(xì)胞  | PZ-HPV-7  | 人前列腺上皮細(xì)胞  | 
T98G  | 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞  | HECCL-1  | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞  | 
HMEC-1  | 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株  | Rca-B  | 大鼠鱗癌細(xì)胞  | 
NCTC1469  | 小鼠正常肝細(xì)胞  | NCI-H1703  | 人肺鱗癌細(xì)胞  | 
HIEC  | 正常人腸上皮細(xì)胞  | LAPC4  | 人前列腺癌細(xì)胞  | 
HPDE6-C7(H6C7)  | 人正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞  | hOMF  | 正常人口腔粘膜成纖維細(xì)胞  | 
RGC-5  | 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞  | CSQT-2  | 人肝癌細(xì)胞  | 
hRMECs  | 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞  | RMC  | 大鼠腎系膜細(xì)胞  | 
MN9D  | 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞  | HEC-251  | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞  | 
HCS-2/8  | 人軟骨肉瘤細(xì)胞  | JVM-3  | 人慢性髓白血病細(xì)胞  | 
RTE  | 大鼠氣管上皮細(xì)胞  | MM96L  | 人黑色素瘤細(xì)胞  | 
NCI-H1993  | 人肺腺癌細(xì)胞  | HHUA  | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞  | 
MONOMAC6  | 急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞  | SAS  | 人舌鱗癌細(xì)胞  | 
SU-DHL-10  | 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  | HSAS1  | 人皮膚成纖維細(xì)胞  | 



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