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MONOMAC6，人急性單核細胞白血病細胞，上海細胞庫   

“細胞空泡化”在細胞培養(yǎng)中也是一個常見問題，它的出現(xiàn)原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼。

在文章中小編給大家列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因，方便大家進行分析選擇解決的方法。

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可以引起細胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些那？

1）細胞老化

原代細胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。

傳代細胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，出現(xiàn)的原因一般都是因為細胞傳代次數(shù)過多，老化嚴重。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。

3）胰酶消化

 胰酶消化時間過長，會導致細胞狀態(tài)受損，有時也會出現(xiàn)這種情況。除此之外，還有一個大家容易忽略的問題,在香港的一家科研機構(gòu)表明如果消化細胞吹打時力度過大，產(chǎn)生太多氣泡，長期存在也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象。

4）自噬

細胞缺乏營養(yǎng)導致饑餓誘導形成自噬也會形成空泡化，但是這種空泡在光學顯微鏡下是看不到的，只有在電鏡下才能觀察到。

5）細胞代謝

在細胞培養(yǎng)過程中，由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現(xiàn)問題，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激狀況下會出現(xiàn)細胞空泡化的情況。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細胞出現(xiàn)空泡化，繼續(xù)培養(yǎng)，空泡范圍會擴大，即使傳代后也如此，出現(xiàn)這種情況，細胞基本無法挽救。后來檢測發(fā)現(xiàn)，此種細胞存在衣原體的感染。

支原體污染：支原體污染在不嚴重的時候細胞是沒有什么明顯癥狀的，而且也無法通過光學顯微鏡觀察到，只有在嚴重的時候會導致細胞狀態(tài)變差，出現(xiàn)細胞空泡化的現(xiàn)象，細胞膜上也會出現(xiàn)小黑點附著。

MONOMAC6，人急性單核細胞白血病細胞，上海細胞庫

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病毒污染：在文獻上也有說病毒污染也會導致細胞出現(xiàn)空泡化的情況。

遇到細胞空泡化我們應該如何解決？

1）如果是因為細胞老化的原因，可以通過復蘇代數(shù)靠前的細胞進行培養(yǎng)。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問題，可以通過更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值，再進行培養(yǎng)。

3）在傳代時，要選用合適濃度的胰酶和選取適當?shù)南瘯r間進行消化，在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡。

4）要保證細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清，因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現(xiàn)這類問題。

6）在細胞培養(yǎng)時要嚴格進行無菌操作，操作時要規(guī)范，減少污染的可能性。可以通過試劑盒檢測細胞是否污染，對于已經(jīng)污染的細胞滅菌后直接處理，避免污染其他細胞。

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